A transformação das plântulas de café com o gene cry1ac de Bacillus thuringiensis foi realizada por biobalística, utilizando todo o pUBC plasmídeo ou só o cassete genético UBI-cry1ac-nos. O gene cry1ac foi inserido no cafeeiro a fim de conferir resistência à folha mineiro Leucoptera coffeella, um inseto responsável por perdas consideráveis nas culturas de café. Tendo em conta que ao plasmídeo e ao cassete genético utilizados para este estudo faltam genes repórteres e/ou de seleção, os parâmetros para o processo de transformação por biobalística foram previamente padronizados com um plasmídeo transportando o gene repórter gus. A presença do gene cry1ac em tecidos de jovens plântulas foi determinada por PCR, Southern blot e transcrição reversa-PCR. Nossos resultados mostram que a obtenção de plântulas de café, transformado por bombardeamento com o gene cry1ac sem genes de seleção genética nem repórteres é viável.

The transformation of coffee plantlets with the cry1ac gene of Bacillus thuringiensis was achieved by biolistic using either the whole pUBC plasmid or only the ubi-cry1ac-nos genetic cassette. The cry1ac gene was inserted into coffee plants in order to confer resistance to the leaf miner Leucoptera coffeella, an insect responsible for considerable losses in coffee crops. Bearing in mind that the genetic cassettes used for this study lack reporter genes and/or selection marker genes, the parameters for the transformation procedure by biolistic were previously standardised with a plasmid carrying the gus reporter gene. The presence of the cry1ac gene in young plantlet tissues was determined by PCR, Southern blot and reverse transcription-PCR. Our results show that the obtainment of viable coffee plantlets, transformed by bombardment with the cry1ac gene and without selection markers nor reporter genes, is feasible.

Regeneration and multiplication of coffee (Coffea arabica L.) through somatic embryogenesis can be efficiently achieved through different methods. However, it is very important to analyze the progenies obtained by these methods in order to establish their genetic stability. The objectives of this research were (1) to determine the protein electrophoretic patterns in leaves of coffee vitroplants which were regenerated through somatic embryogenesis, and (2) to compare these patterns with those of the explant donor plants. The protein patterns of some coffee genotypes were initially determined to detect possible differences among them. Each analyzed genotype showed a characteristic set of protein bands. The protein electrophoretic separation in vitroplants did not show significant differences neither among vitroplants nor between them and the mother plants. According to the protein electrophoretic patterns, the Catimor coffee plants regenerated through somatic embryogenesis have very low levels of variation. These results support evidence of genetic stability in plants of coffee cv. Catimor regenerated by somatic embryogenesis. Additionally, it was shown that the method of onedimensional electrophoresis of proteins can be useful in the characterization of coffee genotypes.

El café (Coffea arabica L.) es una planta para la cual existen métodos eficientes de regeneración y multiplicación por embriogénesis somática. Sin embargo, es muy importante analizar las progenies obtenidas por dichos métodos, con el fin de determinar la estabilidad genética de las mismas. La presente investigación se realizó con el fin de (1) determinar los patrones electroforéticos unidimensionales de proteínas de hojas de vitroplantas de café regeneradas por embriogénesis somática, y (2) comparar los mismos con los de las plantas donantes de explantes. Se determinaron los patrones de proteínas de algunos genotipos de café para establecer si se detectaban diferecias por este método. Dichos patrones revelaron que cada genotipo analizado presentaba un conjunto de bandas de proteínas característico. Las separaciones electroforéticas de proteínas de las vitroplantas no mostraron diferencias significativas entre sí, ni tampoco hubo diferencias significativas al comparar el patrón con las plantas madres. Los resultados obtenidos muestran que de acuerdo al patrón electroforético de proteínas, las plantas de café Catimor regeneradas por embriogénesis somática presentan niveles de variación muy bajos. Por lo tanto, la presente investigación aporta evidencia de la estabilidad genética en las plantas de café cv. Catimor regeneradas por embriogénesis somática. Además, se mostró que el método de electroforesis unidimensional de proteínas puede ser útil en la caracterización de genotipos de café.